兔elisa试剂盒是如何检测的？具体怎么操作？

　　兔ELISA试剂盒的关键技术参数包括板内差异、板间差异、批间差异、重复性、特异性、散布反应、回收率等。如果经常进行ELISA检测，建议使用同一个试剂盒。制造商，以尽可能保证数据的可重复性。至于用于科研的ELISA试剂盒，不同厂家使用的抗体对、酶和底物、生产技术和开发实力不同，不同厂家的试剂盒测得的数据也会不同。

 

　　基本原理：

　　1、抗原或抗体能吸附到固相载体表面，并保持其免疫学活性；

　　2、抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，仍保持其免疫学和酶学活性；

　　3、酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。

 

　　兔elisa试剂盒的检测步骤：

　　1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。若试剂中有晶体析出，回温溶解后方可使用。

　　2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入锡箔袋，保存于2~8℃。

　　3、洗涤工作液在使用前也需回温。

　　4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

　　5、加标准品/样本：加标准品/样本100μL到对应的微孔中，再加入土霉素酶标物50μL/孔，再加入土霉素抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min。

　　6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液250μL/孔，充分洗涤4~5次，每次间隔10s，用吸水纸拍干。

　　7、显色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境反应15min。

　　8、测定：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处，测定每孔OD值。