小鼠表皮生长因子(EGF)elisa试剂盒是如何进行样本处理的？

　　小鼠表皮生长因子(EGF)elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被小鼠表皮生长因子(EGF)抗体的包被酶标板孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠表皮生长因子(EGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

 

 　　小鼠表皮生长因子(EGF)elisa试剂盒样本处理及要求：

　　1、血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　2、血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　3、组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M，pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

　　4、细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

 

　　小鼠表皮生长因子(EGF)elisa试剂盒标本要求：

　　1、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

　　2、不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。